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05 de Abril 2023
Desarrollando Líneas Celulares con Pall Laboratory: Edición Genética
El desarrollo de líneas celulares estables de alta producción es fundamental para la producción de bioterapéuticos como anticuerpos monoclonales, anticuerpos monoclonales biespecíficos, proteínas de fusión y vacunas. Se sabe lo costoso que es el proceso de descubrimiento de fármacos.
Para reducir estos costes, los investigadores trabajan bajo mucha presión para conseguir rapidez y eficacia en las primeras fases del descubrimiento bioterapéutico y la selección de candidatos bioterapéuticos. La clave para impulsar la eficiencia es generar y seleccionar rápidamente líneas celulares clonales que brinden altas concentraciones de proteína recombinante de calidad, descartando lo antes posible los candidatos clonales que puedan fracasar en el escalado del proceso.
Como líder mundial en sistemas de filtración y purificación de alta tecnología, Pall ofrece soluciones para ayudar a los investigadores en todo el proceso de desarrollo de líneas celulares. Las membranas
Las membranas patentadas de alto rendimiento abordan los retos de la compleja biología de nueva generación, a la vez que apoyan el escalado a procesos de fabricación comerciales. Los productos innovadores y que ahorran tiempo para la filtración, separación y preparación de muestras ayudan a agilizar los flujos de trabajo y garantizan la esterilidad desde la edición de genes, pasando por el cultivo celular, hasta el análisis ómico. En el presente artículo hablaremos sobre la edición genética.
Edición genética
La edición de genes ha avanzado en los últimos años gracias a herramientas moleculares como las nucleasas de dedos de zinc (ZFN), las nucleasas efectoras similares a activadores de la transcripción (TALEN) y, más recientemente, el sistema CRISPR/Cas9. Estas técnicas han mejorado considerablemente la precisión y la facilidad de uso a la hora de diseñar líneas celulares para una producción bioterapéutica óptima.
A pesar de los avances técnicos, los flujos de trabajo de edición genética en varios pasos siguen requiriendo muchos recursos: selección de genes, amplificación por PCR, extracción de ADN, limpieza del ADN, digestión con enzimas de restricción, ligación y, por último, verificación de la inserción. Se requiere una vigilancia constante para evitar la contaminación y las complicaciones posteriores. Las técnicas estándar suelen implicar múltiples pasos de purificación, cada uno de ellos asociado a una pérdida significativa de producto.
Por lo tanto, se necesitan grandes cantidades de ADN de calidad para garantizar el éxito de la transformación o transfección celular.
Soluciones Pall Life Sciences
Los dispositivos de ultrafiltración centrífuga de Pall simplifican muchos procedimientos comunes de preparación de ácidos nucleicos. La digestión de restricción del ADN plasmídico y los productos de amplificación del ADN pueden llevarse a cabo dentro del dispositivo centrífugo. Las construcciones de ADN pueden concentrarse y desalarse al tiempo que se permite que los cebadores y otros contaminantes pasen al filtrado desechado durante un paso de centrifugación de cinco minutos.
La ligación de los fragmentos de ADN en el vector también puede completarse directamente dentro del dispositivo de ultrafiltración, dejando el producto listo para su transformación en células competentes.
La reducción de transferencias innecesarias y de la manipulación de líquidos de la muestra supone un ahorro significativo de tiempo, mano de obra y materiales de partida.
Los productos de unión de ácidos nucleicos (NAB) proporcionan flexibilidad, reducen el riesgo de contaminación cruzada y facilitan el procesamiento de las muestras. El dispositivo centrífugo NAB Nanosep® incorpora una innovadora membrana de fibra de vidrio de doble capa de alta unión.
Los rendimientos de alta calidad y cantidad, con una recuperación uniforme de fragmentos tan pequeños como 50 pb hasta 10.000 pb, admiten múltiples aplicaciones posteriores, al tiempo que ahorran tiempo y recursos al eliminar la necesidad de procesar muestras adicionales.
Los productos NAB están disponibles en formato de dispositivo de centrifugación de tubo único Nanosep® y en formato de placa de filtrado de 96 pocillos AcroPrep™ Advance de alto rendimiento. Estos medios ofrecen a los investigadores la flexibilidad de purificar ADN plasmídico (ADNp), y ADN genómico (ADNg), o ARN total en un único dispositivo.
| Conozca más sobre estos equipos en la Categoría “Instrumentacion para ciencias de la vida ” de en nuestra web. Para más información, puede comunicarse con nosotros al 01 336-6523 o ventas@omegaperu.com.pe |
Fuentes:
Pall Corporation. Cell Line Development. (2022). Pall Laboratory. USA.
Pall Corporation. Gene Editing. (2022). Pall Laboratory. USA.