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¿Sabes qué equipos se requieren para la prueba molecular de coronavirus?
¿Qué diferencias hay entre un test rápido y un PCR?
4 de junio de 2020
¿Qué es el coronavirus –COVID 19?
Los coronavirus son una extensa familia de virus que pueden causar enfermedades leves como el resfriado común, y enfermedades graves como el SRAS (síndrome respiratorio agudo severo) o el MERS-CoV (Síndrome respiratorio de Oriente Medio) y más recientemente el nuevo coronavirus identificado por primera vez en la ciudad Wuhan en China, este nuevo virus altamente contagioso fue nombrado oficialmente como SARS-CoV-2, además el nombre oficial de la enfermedad provocada por el nuevo virus es “COVID-19” según la OMS.
¿Qué pruebas se usan actualmente para detectarlo, y en que se diferencian?
Prueba serológica (test rápido)
No detecta al virus de manera directa.
Detecta los anticuerpos IgM e IgG presentes en la sangre o plasma ,cuando una persona ha estado o esta enferma de COVID 19.
El resultado tarda 15 minutos y no se requiere de equipos de laboratorios complejos.
Tiene un grado de sensibilidad entre 34-80%, no los recomienda la OMS .
La prueba molecular (PCR)
Ocurre la reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa, más conocida como ‘RT-PCR
Detecta directamente el ARN ,es decir, material genético del virus.
El resultado tarda entre 2-3 horas y requiere de un equipamiento adecuado para su ejecución.
Tiene un alto grado de sensibilidad y es recomendada por la OMS
¿En qué consisten las pruebas moleculares PCR-RT?
1. RECOLECCIÓN Y TRANSPORTE DE LA MUESTRA
- Se recolecta muestra del fondo de la nariz o boca de la persona.
- Las muestras son transportadas y conservadas en una cadena de frio entre 2-8°C hasta el laboratorio
2. EXTRACCIÓN DEL ARN DEL VIRUS
- Se toma una alicuota de la muestra recolectada y se sigue el procedimiento recomendado por el fabricante del reactivo de lysis , para lograr la recuperacion y purificacion del ARN del virus ,y quede listo para su uso en el PCR-RT.
- Para lograr volúmenes exactos y evitar la contaminación cruzada se debe emplear micropipetas y puntas esteriles y autoclavables.
- Para obtener una efectiva agitación ,suspención de celulas se emplea un agitador vortex.
- Para aislar el ARN ,se debe usar una microcentrifuga y sus accesorios que permita separar
3. PREPARACIÓN Y ANÁLISIS EN PCR
- Se prepara en placas de PCR la adicion del ARN aislado y reactivos quimicos (cebadores y enzimas).
- Se convierte el ARN en ADN .
- El ADN obtenido se mezcla con los cebadores.
- Al calentar y enfriar repetitivamente una mezcla del ADN del virus, los cebadores y una enzima que sintetiza el ADN , se producen millones de copias de ADN viral.
- Las moléculas del tinte fluorescente se unen al ADN del virus durante la copia.
- Cuantas más copias del ADN del virus se producen, mayor es la fluorescencia.
- Si la fluorescencia supera un cierto umbral, el test da positivo.
- Todo lo descrito son ejecutados en el equipo PCR -Tiempo Real.
EQUIPOS Y SUMINISTROS NECESARIOS PARA:
1. RECOLECCIÓN Y TRANSPORTE DE LA MUESTRA
*Transporte y conservación de muestras entre 2 a 8°C:
Para la correcta dosificación de pequeños volúmenes y evitar la contaminación cruzada.
Se cuenta con una amplia gama de pipetas autoclavables de diferentes
• Rangos de volumen: 0.5-10Ul ,2-20Ul, 5-10Ul, 10-100 Ul, 100-1000Ul, etc.
• Tipos: Volumen ajustable, mecánicos, electrónicos.
• Canales: Único, multicanales (8,12).
*Agitador vórtex : Para una agitación efectiva.
Especificaciones
Imagen referencial
Marca
COLEPARMER
STUART
Velocidad Máxima (rpm)
4000
9200
13000
6000
8500
Velocidad Minima (rpm)
6000
1000
Max RCF xg
1830
15493
2000
3884
Tipo de rotor
Ángulo fijo
Rotores incluidos
Sí
Capacidad máxima
6 tubos de 10 ml.
8 tubos de 1.5 o 2.0 mL , 4 tubos de 5 mL, 2 tiras de 8 plazas o 16 tubos de 0.2ml para PCR
24 tubos de 1.5 o 2.0 ml
8 tubos de 1.5 o 2.0 mL, 32 tubos de 0.2 mL para PCR
8 tubos de 1.5 a 2.0 mL, 32 tubos de 0.2 mL para PCR
Medios de fibra de vidrio a base de silice que permiten la union eficiente de ARN y ADN.
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